Submerged culture conditions for the production of mycelial biomass and antimicrobial metabolites by Polyporus tricholoma Mont. / Condições de cultivo em meio líquido para produção de biomassa e metabólitos antibacterianos por Polyporus tricholoma Mont.

Basidiomycete fungi of the Polyporus genus are a source of secondary metabolites which are of medicinal interest as antibacterial compounds. As these substances are produced in a small amount by the fungi, the study of the cultivation conditions in vitro that could possibly optimize their production seems of major importance. The effects of glucose and lactose, pH and agitation on biomass concentration and on the specific growth rate caused by the basidiomycete Polyporus tricholoma were investigated. The initial pH (4.5, 6.5 and 8.5) was autoregulated at pH 5.5, and the agitation increased the mycelial growth and the specific growth rate. The high concentration of carbon sources (4 percent) increased biomass production. The lactose concentration and the absence of agitation were determinant in the production of antibacterial metabolites. The characterization of the antibacterial substance by GC-MS indicated a major compound, isodrimenediol, produced by the fungus Polyporus tricholoma with activity against Staphylococcus aureus.

Os fungos basidiomicetos do gênero Polyporus são fonte de metabólitos secundários de interesse medicinal como os compostos antibacterianos. Como estas substâncias são produzidas em pequenas quantidades pelos fungos, o estudo de condições de cultivo in vitro que otimizem sua produção, é de fundamental importância. Os efeitos da glicose e lactose, pH e agitação na concentração da biomassa e na velocidade específica de crescimento realizada pelo basidiomiceto Polyporus tricholoma foram investigados. O pH inicial (4.5, 6.5 e 8.5) foi autoregulado para pH 5.5, e a agitação aumentou o crescimento micelial e a velocidade específica de crescimento. A maior concentração das fontes de carbono (4 por cento) incrementou a produção de biomassa. A concentração de lactose e a ausência de agitação foram determinantes na produção dos metabólitos antibacterianos. A caracterização da substância antibacteriana por CG-EM mostrou como componente majoritário o isodrimenediol, produzido pelo fungo Polyporus tricholoma, com atividade contra Staphylococcus aureus.

Antimicrobial activity of wax and hexane extracts from Citrus spp. peels

Antibacterial and antifungal properties of wax and hexane extracts of Citrus spp. peels were tested using bioautographic and microdilution techniques against three plant pathogenic fungi (Penicillium digitatum, Curvularia sp., and Colletotrichum sp.), two human pathogens (Trichophyton mentagrophytes and Microsporum canis), and two opportunistic bacteria (Escherichia coli and Staphylococcus aureus). Two polymethoxylated flavonoids and a coumarin derivative, were isolated and identified from peel extracts, which presented antimicrobial activity especially against M. canis and T. mentagrophytes: 4',5,6,7,8-pentamethoxyflavone (tangeritin) and 3',4',5,6,7,8-hexamethoxyflavone (nobiletin) from C. reticulata; and 6,7-dimethoxycoumarin (also known as escoparone, scoparone or scoparin) from C. limon.

Complete ¹H and 13C NMR assignments and anti fungal activity of two 8-hydroxy flavonoids in mixture

A mixture of the two new flavonols 8-hydroxy-3, 4', 5, 6, 7-pentamethoxyflavone (1) and 8-hydroxy-3, 3', 4', 5, 6, 7-hexamethoxyflavone (2) was isolated from a commercial sample of Citrus aurantifolia. An array of one- (¹HNMR, {¹H}-13C NMR, and APT-13C NMR) and two-dimensional NMR techniques (COSY, NOESY, HMQC and HMBC) was used to achieve the structural elucidation and the complete ¹H and 13C chemical shift assignments of these natural compounds. In addition, the antifungal activity of these compounds against phytopathogenic and human pathogenic fungi was investigated.

Os flavonóis 8-hidroxi-3, 4', 5, 6, 7-pentametoxiflavona (1) e 8-hidroxi-3, 3', 4', 5, 6, 7-hexametoxiflavona (2) foram isolados em mistura a partir de uma amostra comercial de Citrus aurantifolia. A determinação estrutural e a inequívoca atribuição dos sinais de deslocamento químico dos átomos de hidrogênio e carbono destes compostos naturais foram realizadas através da análise dos espectros de RMN 1D e 2D, incluindo COSY, NOESY, HMQC e HMBC. Em adição, a atividade antifúngica destes compostos contra fungos patogênicos também foiinvestigada.

Screening methods to determine antibacterial activity of natural products

The emergence of new infectious diseases, the resurgence of several infections that appeared to have been controlled and the increase in bacterial resistance have created the necessity for studies directed towards the development of new antimicrobials. Considering the failure to acquire new molecules with antimicrobial properties from microorganisms, the optimization for screening methods used for the identification of antimicrobials from other natural sources is of great importance. The objective of this study was to evaluate technical variants used in screening methods to determine antibacterial activity of natural products. Thus, a varied range of natural products of plant, fungi and lichen origin were tested against two bacterial species, Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 25922, by two variants of the agar diffusion method (well and disc), two variants of the bioautographic method (direct and indirect) and by microdilution assay. We concluded that the well-variant of the diffusion method was more sensitive than the disc-variant, whilst the direct-variant of the bioautographic method exhibited a greater sensitivity if compared to indirect-variant. Bioautographic and diffusion techniques were found to have similar sensitivity; however the latter technique provided more suitable conditions for the microbial growth. In this study, we also discussed the best conditions for the determination of minimal inhibitory concentration.

Com o surgimento de novas doenças infecciosas, o reaparecimento de várias infecções que pareciam ter sido controladas, e o aumento da resistência bacteriana houve a necessidade de pesquisas dirigidas ao desenvolvimento de novos antimicrobianos. Levando em consideração a dificuldade de aquisição de novas moléculas com atividades antimicrobianas, a otimização de métodos de triagem usados na identificação de antimicrobianos de fontes naturais é de grande importância. O objetivo deste estudo foi avaliar variantes técnicas, usadas em métodos de triagem para determinar atividade antibacteriana de produtos naturais. Assim, vários produtos naturais, oriundos de plantas, fungos e líquens foram testados contra duas espécies bacterianas, Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Escherichia coli ATCC 25922, por duas variantes do método de difusão em ágar (poço e disco), duas variantes do método bioautográfico (direto e indireto) e por testes de microdiluição. Concluímos que a variante do método de difusão variante poço foi mais sensível do que a variante disco, enquanto que a variante direta do método bioautográfico exibiu uma sensibilidade maior, comparada com a variante indireta. As técnicas de bioautografia e difusão mostraram sensibilidades similares, embora a última tenha fornecido condições mais apropriadas para o crescimento bacteriano. Neste estudo, também discutimos as melhores condições para a determinação da concentração inibitória mínima.

Antimicrobial activity of methyl australate from Ganoderma australe

In addition to nine known steroidal compounds, australic acid and the new methyl australate have been isolated from the Brazilian fungus Ganoderma australe. Both methyl australate and its corresponding acid were shown to be active against fungi and Gram-positive bacteria, the methyl ester being also active against Gram-negative bacteria.

Do fungo brasileiro Ganoderma australe foram isolados o ácido austrálico e o novo composto australado de metila, além de outros 9 compostos já conhecidos. Tanto o australado de metila quanto o ácido correpondente foram ativos contra fungos e bactérias Gram-positivas, sendo o éster metílico ainda ativo contra bactérias Gram-negativas.

Antibacterial activity of orsellinates

Para obter novos compostos com atividade antibacteriana, foram preparados os derivados 2,4-diidróxi-6-metilbenzoatos (orselinatos) e o ácido 2,4-diidróxi-6-metilbenzóico (ácido orselínico) através de reacões de alcoólise do ácido lecanórico. Todas as substâncias foram testadas contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas pelo método da microdiluicão. Staphylococcus aureus, Xanthomonas campestris var. vesicatoria and Ralstonia solanacearum foram mais sensíveis ao 2,4-diidróxi-6-metilbenzoato de n-propila, 2,4-diidróxi-6-metilbenzoato de n-pentila e 2,4-diidróxi-6-metilbenzoato de n-hexila com valores de CIM (Concentracão Inibitória Mínima) variando de 62,5 a 7,8 µg.mL1. Esses resultados mostraram que a homologacão da cadeia carbônica pode conduzir a compostos mais ativos.

Biological screening of Brazilian medicinal plants

In this study, we screened sixty medicinal plant species from the Brazilian savanna ("cerrado") that could contain useful compounds for the control of tropical diseases. The plant selection was based on existing ethnobotanic information and interviews with local healers. Plant extracts were screened for: (a) molluscicidal activity against Biomphalaria glabrata, (b) toxicity to brine shrimp (Artemia salina L.), (c) antifungal activity in the bioautographic assay with Cladosporium sphaerospermum and (d) antibacterial activity in the agar diffusion assay against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus cereus and Pseudomonas aeruginosa. Forty-two species afforded extracts that showed some degree of activity in one or more of these bioassays.

Cinnabarin synthesis by "Pycnoporus sanguineus" strains antimicrobial astivity against bacteria from food products

Among three strains of "Pycnosporus sanguineus", MIP 89007 produced more cinnabarin than MIP 95001 and MIP 95002. The antimicrobial activity of cinnabarin was tesred against 11 species of bacteria isolated from food. "Bacillus cereus" and "Leuconostoc plantarum" were the most sensitive to cinnabarin, being inhibited by 0.0625 mg/ml. "Klebsiella pneumonia" was the least sensitive (>4.0 mg/ml).

Growth and production phases of pycnoporus sanguineus

Foi observado que na cultura de Pycnoporus sanguineus MIP 89007, a síntese de substâncias com atividade antimicrobiana ocorreu principalmente entre o 18§. e o 23§. dia de incubaçäo. Além disso, foi também constatado que a substância produzida foi rapidamente degradada quando permaneceu no caldo de cultura após ter cessado a síntese e que os extratos obtidos a partir do fungo somente retiveram a atividade quando mantidos à vácuo

Aumento da resistência a agentes antimicrobianos de amostras de Neisseria gonorrhoeae isoladas em Florianópolis (SC)-Brasil / Decreased susceptibility to antibiotics among neisseria gonorrhoeae isolates in Florianópolis

Resumo: Foi avaliada a sensibilidade de amostras de Neisseria gonorrhoeae contra 6 agentes antimicrobianos. Observoutse que 14.63 (por cento) dos isolados foram resistentes à ampicilina, 45 (por cento) à ceftriaxona, 16,6 (por cento) à eritromicina, 29,27 (por cento) à penicilina, 78,57 (por cento) à tetracilina e nenhum à cefoxitina. Quatro amostras foram produtoras de B-lactamase, representando uma ocorrência de 9,52 (por cento) de N. gonorrhoeaae produtora de penicilinase na populaçäo estudada (au)

Comparaçåo do método de Lancefield, com extraçåo antigênica pelo processo de El Kholy, com o "Kit" comercial Phadebact para grupagem sorológica de estreptococos / Comparison of the Lancefield method using antigenic extraction by the El Kholy process with the Phadebact kit for streptococci serological grouping

Cento e quarenta e três amostras de estreptococos beta-hemolíticos foram submetidas à grupagem sorológica pelo método de precipitaçåo em tubo capilar, utilizando-se extratos antigênicos obtidos segundo a técnica descrita por EI KHOLY e col., e pelo "kit" comercial fornecido pela Pharmacia. Os resultados obtidos foram coincidentes em 100 por cento das amostras testadas, o que permite a cada laboratório optar pela técnica que melhor se adaptar à sua realidade

Resistência a agentes antimicrobianos de amostras de Neisseria gonorrhoeae isoladas em Florianópolis (SC) / Resistance to antimicrobial agents of Neisseria gonorrhoeae strains isolated at Florianópolis, Santa Catarina

Em abril de 1988 e maio de 1990 foram isoladas 81 amostras de Neisseria gonorrhoeae de pacientes atendidos em laboratórios públicos e privados. Dentre os isolados, 54.32 por cento foram resistentes à penicilina, 43.21 por cento à ampicilina, 7.41 por cento à gentamicina e 69.14 por cento à tetraciclina. Três amostras produziram ß-lactamase, representando uma ocorrência de 3.7 por cento de Neisseria gonorrhoeae produtora de penicilinase na população estudada.

Infeccao gonococica disseminada: relato de um caso / Gonococcal infection disseminated: a report of a case

Esta nota relata um caso clinico de artrite septica por "Neisseria gonorrhoeae". O microrganismo foi isolado a partir do liquido sinovial e a sensibilidade a antimicrobianos foi verificada pelo metodo de difusao em agar. O gonococo isolado foi sensivel aos beta-lactamicos, aos aminoglicosideos, a eritromicina, a rifampicina e resistente ao sulfametaxazol-trimetoprim e a tetraciclina.

Um novo meio para a conservaçäo de Neisseria / A new medium (MSE) for the preservation of Neisseria

Um novo meio (MSE) foi desenvolvido para a conservação e estocagem de espécies de Neisseria patogênicas para o homem. Dez amostras de meningococo e 10 de gonococo foram estocadas neste meio e mantiveram a viabilidade até 8º e 5º mês, respectivamente.

Staphylococcus isolados a partir do leite bovino in natura / Staphylococcus hyicus subsp. chromogenes isolated from bovine milk in natura

Staphylococcus hyicus subsp chromogenes foi isolado a partir do leite bovino coletado em 5 dos 40 animais estudados. Este resultado corresponde a uma incidência de 12,5 por cento. As amostras foram testadas quanto a capacidade de produção de enterotoxinas, porém mostraram-se negativas. Foi também verificada a sensibilidade das amostras a agentes antimicrobianos. Todas foram sensíveis à ampicilina, cefalotina, eritromicina, gentamicina, lincomicina, penicilina, tetraciclina e tobramicina. Apenas um foi resistente ao cloranfenicol e uma outra à estreptomicina.

Sensibilidade de Streptococcus agalactiae aos agentes antimicrobianos / Susceptibility of Streptococcus agalactiae to antimicrobial agents

A sensibilidade de Streptococcus agalactiae frente a 13 antimicrobianos foi verificada pelo teste da difusäo em ágar. As amostras testadas foram sensíveis a ampicilina, cefalotina, cefoxitina, clindamicina, cloranfenicol, eritromicina, lincomicina, penicilina, rifampicina e vancomicina, apresentando sensibilidade variável para a tetra ciclina e resistência a canamicina e tobramicina. Foram também determinadas, para as estirpes, as concentraçöes mínimas inibitórias (CMIs) pelo teste da diluiçäo em ágar para 6 antimicrobianos. Para a ampicilina, cefalotina, clindamicina, lincomicina e penicilina, as CMI50 e CMI90 apresentaram valores similares aos encontrados para a CMI. Para a eritromicina, a CMI90 (0,12 microng/ml) foi duas vezes maior que a CMI50

Isolamento de estreptococos do grupo B, de gestantes e neonatos, em Florianópolis, Santa Catarina / Isolation of group B streptococci in parturient and newborn, in Florianópolis (SC)

O ocorrência de estreptococos do grupo B de Lancefield foi estudada em 135 parturientes na Maternidade Carmela Dutra em Florianópolis (SC) e em seus respectivos neonatos. Os materiais clínicos foram coletados da vagina das mulheres, do ouvido dos neonatos e do ânus de ambas as populaçöes. As taxas de isolamento do microorganismo foram de 25,2% entre as mäes, 11,9% entre as crianças e de 18,5% entre as duas populaçöes. Foram isoladas 75 amostras, sendo que ocorreu um predomínio dos tipos sorológicos II/Ic e III. Em 14 binômios foi isolado o mesmo tipo sorológico na mäe e no neonato correspondente

Susceptibilidade de Estreptococos do grupo B isolados no período perinatal aos antimicrobianos / Antimicrobial susceptibility of groups B Streptococcus isolated in the perinatal period

A susceptibilidade de 107 amostras de estreptococos do grupo B a 10 antibióticos foi avaliada "in vitro" pela técnica de difusäo do antibiótico a partir de discos e pela determinaçäo da concentraçäo mínima inibitória através do método de diluiçäo em agar. Todas as amostras foram sensíveis às penicilinas, cefalotina, lincomicina e cefoxitina, e resistentes a dois aminoglicosídeos. Somente 7,5% dos microrganismos foram sensíveis à tetraciclina e menos de 2% foram resistentes ao cloranfenicol e eritromicina. Entre os antibióticos aos quais pelo menos 90% das amostras foram sensíveis, as concentraçöes inibitórias variaram de 0,06 microng/ml para a penicilina a 8 microng/ml para o cloranfenicol. Já para os aminoglicosídeos e a tetraciclina esses valores foram >- 32 microng/ml